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科研学霸天团,48小时有问必答
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投稿outside source提问
sswei
这个外部基金如果是国自然或国外的要填。
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问
求助RBC磷脂检测
sswei
将血液取放在加有抗凝剂的容器内,用低速离心的方法从血液中分离出红细胞,然后用等渗缓冲液重复洗涤多次,去除血浆。将洗净的红细胞从等渗缓冲液转移到低渗缓冲液中,由于渗透压力作用于细胞质膜,使红细胞膨胀而溶血。将溶血的红细胞经过充分反复洗涤。高速离心,去除血红蛋白和其他细胞内含物。这样制备所获得的最终产品几乎全是红细胞膜。将试样分散于氯仿 -甲醇混合液中,在水浴中轻微沸腾,氯仿 -甲醇及样品中一定的水分
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问
qPCR 检测巨噬细胞分型
dxyc42u
建议排查下qpcr复孔差异大的时候容易出现这种结果
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问
挑单克隆跑不出条带
土井挞克树
存在自杀基因的话考虑可能是凋亡降解了,所以PCR找不到
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问
求助大佬,胶体金半定量,怎么测出那种某个范围值的结果
sswei
胶体金标记是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。免疫金标记技术(Immunogold labelling techique) 主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性,在金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的配体处大量聚集时,肉眼可见紫色斑点,因而用于半定量的快速免疫检测方法。
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问
不用流式分选,单纯磁珠分选CD4+T 细胞可以直接诱导tfh吗?诱导体系内是否有IL-6?
土井挞克树
单纯磁珠可以直接诱导tfh的,不包含il6
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问
克隆形成实验染色后克隆不是圆形
土井挞克树
细胞可能是克隆之后老化了,降低密度重新培养看看,或者重新克隆
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问
293T细胞状态不好
dxy_tackm836
我的细胞铺在96孔板里面培养24h观察是正常的,换培养基后细胞就变少了,而且还不贴壁,请问这种情况怎么处理
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问
求解~阴性对照组细胞死亡
土井挞克树
可以考虑降低阴性组的细胞密度,考虑是细胞密度太大了
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提取脐带血cd34细胞
土井挞克树
可以用红细胞裂解液把红细胞裂解掉,然后再离心去除
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求助:TGF-β1刺激巨噬细胞RAW264.7有效浓度
土井挞克树
文献的浓度是参考浓度,建议你提高浓度直到测出阳性
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问
观察一种药物对肿瘤细胞增殖凋亡的影响,用药前必须饥饿处理吗?
dxyc42u
用药前不是必须饥饿处理,根据细胞生长速度决定
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问
免疫组化结果
土井挞克树
免疫组化结果一般看染色强度,一般蛋白表达和染色强度成正比。目的蛋白显色代表染色成功
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问
请问各位有没有罗丹明B脂肪酶检测平板的水解圈图呀
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请问准备送做质谱的细胞样品在室温放了一天,大约十几度,天不算热,蛋白会不会降解啊
balalaLy
蛋白会降解,会有影响,建议弃掉。
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问
酶标仪结果显示加号是什么意思
是TTT
超过量程了,是不是没有稀释就直接测了
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问
求助!求一个RAW264.7巨噬细胞极化CD86和CD206流式双染protocol
loveliufudan
以下是一个基本的RAW264.7巨噬细胞极化的CD86和CD206的流式双染实验协议。请注意,该协议可能需要根据实验条件和实验室特定要求进行优化和调整。材料:- RAW264.7巨噬细胞- 细胞培养基(适当的培养基根据实验需求选择)- 胶体金标记的抗CD86抗体- 荧光标记的抗CD206抗体- 细胞染色缓冲液(如PBS)步骤:1. 将RAW264.7巨噬细胞培养在适当的培养基中,使其达到适当的细胞
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细胞免疫荧光试验(myogenesis)
土井挞克树
这个颜色差异考虑是一抗二抗浓度太低,建议提高抗体浓度
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HL-60分化成中性粒细胞
loveliufudan
在HL-60细胞系中使用1.25% DMSO和1μM all-trans retinoic acid (ATRA)诱导中性粒细胞分化是常见的方法之一。然而,染色不成功和出现腕状触手可能是由于一些因素导致的。1. 染色不成功:染色的成功与多个因素相关,包括样本制备的质量、染色试剂的有效性和使用的染色方法。确保样本制备过程中的细胞数适当、细胞均匀分布,试剂浓度正确,染色时间适当,并按照染色方法的步骤进
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免疫组化Ki67没有阳性结果
loveliufudan
如果在进行免疫组织化学染色(IHC)过程中没有观察到预期的阳性结果,可能有多种潜在问题。以下是一些可能导致问题的因素和建议的解决方法:1. 组织固定和处理:确保福尔马林固定的组织处理得当,固定时间足够,并且在石蜡包埋和切片制备过程中没有出现问题。确保切片切割质量良好且组织未被破坏。2. 热修复:柠檬酸钠热修复用于恢复组织中的抗原表达,如果修复时间或温度不足,可能导致抗原未能完全恢复。尝试增加修复时
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