在WB中，小鼠的后腿肌肉的Actin为什么跑不出条带？

多数情况是抗体加错了；如果中间出现了微弱的条带，可能原因是蛋白上样量太少，一抗浓度过低，ECL发光液稀释过高或失效。若转膜出现了失误，比如膜放反了，肯定白片

因为actin是非肌型肌动蛋白，不适合用于骨骼肌的内参

我们实验室在跑WB过程中也会出现这样的条带，我自己觉得原因如下：1.在上样过程中上样孔内有异物，没有提前冲上样孔，导致曝光后条带出现深浅不均匀的情况。2.发光液没有滴加均匀，可以将膜放在封口膜上，滴加发光液使其均匀分布在膜上再进行曝光。总结：个人出现这样的原因与上样关系密切。

主要考虑以下几点原因:1.在上样过程中上样孔内有异物，没有提前冲上样孔，导致曝光后条带出现深浅不均匀的情况。2.发光液没有滴加均匀，可以将膜放在封口膜上，滴加发光液使其均匀分布在膜上再进行曝光。

可以提高后腿肌肉的刺激电流，可能是电流没有达到肌肉阈值