WB中actin有很多非特异性条带，排除了不是封闭液和一抗的问题，如下图，左右两边是marker

以下是一些可能导致非特异性条带的原因和解决方案：

1. 蛋白质加载量过高：尝试减少加载样品的蛋白质量，优化加载浓度。

2. 蛋白质转印条件不当：确保转印条件（如电流、时间等）正确，并且膜的完整性良好。

3. 蛋白质提取和裂解缓冲液的成分：检查蛋白质提取缓冲液和裂解缓冲液的成分是否适当，并尝试优化提取条件。

4. 二抗的选择和浓度：确保选择合适的二抗，并优化其浓度和孵育条件。

5. 清洗步骤和缓冲液的成分：仔细清洗膜以去除非特异性结合，并确保使用含有正确成分的洗涤缓冲液。

一抗特异性不好，非特异性与蛋白结合，或是准备的样品有所降解

在Western blot中出现非特异性条带，可能有以下几个原因：

1. 蛋白质样品中存在其他蛋白质：如果蛋白质样品中存在其他蛋白质，这些蛋白质可能与actin结合并形成非特异性复合物。因此，为了避免这种情况的发生，可以尝试使用纯化的actin标准蛋白或者使用更高的浓度的actin一抗。

2. 蛋白质样品中存在丰富的actin：如果蛋白质样品中存在大量的actin，可能会导致actin与其他蛋白质结合形成非特异性复合物。可以尝试使用更低的蛋白质样品浓度或者使用更高的浓度的actin一抗来避免这种情况的发生。

3. 次级抗体的非特异性结合：如果使用的次级抗体结合不够特异性，可能会导致非特异性的条带出现。可以尝试更换次级抗体或者使用更高的浓度的次级抗体来避免这种情况的发生。

4. 胶体的质量问题：如果使用的SDS-PAGE胶体质量不好，可能会导致蛋白质分离不完全，从而出现非特异性的条带。可以尝试更换胶体或者使用更好的质量的胶体来避免这种情况的发生。

多查阅一下文献，是不是你要检测的蛋白时有多个亚基，或者你的一抗是多克隆抗体也会导致条带，其次过程中要注意抗体孵育条件，4摄氏度过夜比较稳定

可能是蛋白降解，注意收蛋白时保持低温，提取后尽快加热变性。