WB整个背景都是杂条带是什么回事嘞
科研打工修勾
有老师帮忙看一下吗？
上样量是每个孔5ug蛋白
5%脱脂奶粉封闭一个小时
一抗说明书是1：2000~1：10000
选择稀释比例是1：8000；
TBST洗膜，洗5次，每次3分钟
抗体说明书的的条带位置在56kDa，实际做出来未见目的蛋白反而出现特别多的其他条带，
4 个回答
feixue7758527w
有帮助
我觉得你的样本首先要适度纯化。
然后分离机胶可以换一个浓度试试。换成小浓度分离胶试试。然后洗脱时间加长一点。
huarenqiang5
有帮助
建议提高蛋白上样量在10ug以上试试。
balalaLy
有帮助
蛋白上样量太低了，一般是10-20ug。另外，抗体的浓度可以再优化一下。
土井挞克树
有帮助
可能是封闭不足，洗膜没洗干净，建议多封闭一下。
洗膜的时候多洗几次。
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