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        CO-OP细胞裂解

        相关实验:用于免疫印迹的动物培养细胞、酵母和细菌的裂解实验

        user-title

        H6WT

        裂解液没加PMSF,裂了15min,后来补加,再裂解15min,蛋白会降解吗?

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        4 个回答

        user-title

        z流沙z

        有帮助

        有可能会降解一些,但如果全程都在冰上应该还好

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        PMSF可加可不加,建议额外加蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        如果在细胞裂解过程中没有加入PMSF,那么存在一定的可能性蛋白质会被蛋白酶降解,尤其是在含有蛋白酶的细胞类型中,如胃腺细胞或胰腺细胞等。

        在裂解15min后补加PMSF,虽然可以起到保护蛋白质的作用,但已经有一部分蛋白质可能已经被蛋白酶降解。因此,为了尽量保持样品中的蛋白质完整性和活性,最好在裂解液中最开始就加入PMSF,并在整个裂解过程中保持其作用。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        不会,但是有可能裂解不充分,可以增加裂解时间

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