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        酵母单杂交相关求助!

        相关实验:酵母双杂交技术

        user-title

        dxy_27r7tq19

        我的酵母是Y1HGold 重组载体是pAbAi

        现在已经将载体线性化,转入酵母感受态后,400微升悬浮沉淀,取100微在SD/-Ura固体培养基上涂布,第二天发现长的菌落很小很细密,真的很小,直径也就是0.1毫米,而且是成片的长。这个转化效率有这么高吗,还是涂布浓度太高?现在完全找不到结果

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        3 个回答

        user-title

        dxy_rbusixu0

        有帮助

        你好 请问你最后转化成功了吗 你的质粒浓度是多少呀


        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        菌落非常小,可能意味着您的转化效率较低。如果您使用的是高效的转化方法,则转化效率通常应该在10^5 - 10^8 CFU/μg DNA之间。因此,您可以尝试优化涂布浓度或尝试其他转化方法来提高转化效率。

        以下是一些可能有助于提高酵母转化效率的建议:

        转化前的细胞处理:酵母细胞的生长状态、洗涤和处理方式等,都可能对转化效率产生影响。确保使用处于对数生长期的健康细胞,并且在转化前彻底洗涤细胞。

        DNA质量:DNA应该是高质量的,并且应该在无菌条件下制备。纯化后的DNA应该在低温下保存,并且应该在转化前进行快速处理以减少暴露时间。

        转化试剂:不同的转化试剂和条件可能对转化效率产生影响。您可以尝试使用不同的试剂和条件来确定哪种方法最适合您的实验。

        涂布浓度:涂布浓度太高可能会导致菌落过于密集,使得单个菌落变得难以识别。您可以尝试使用不同的涂布浓度来确定哪种浓度最适合您的实验。

        选择性培养基:使用适当的选择性培养基是酵母转化的关键。您可以尝试使用其他不同的选择性培养基,以寻找更适合您实验的培养基。


        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        涂的浓度太高,把浓度降低一些。

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