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        P65和pp65都下调了,说明什么。

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        橘子不酸也不甜

        各位大神,细胞给药后,p65和pp65都呈剂量依赖性下调,这个怎么解释,能说明化合物抑制了nfkb的表达吗,条带分析的时候,还能以p65做内参吗?

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        3 个回答

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        可以认为是抑制了nfkb通路,但是建议再检测一下通路中的p50等,并且更换内参不能用total的p65 当内参了,可以考虑beta-actin或gapdh

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        土井挞克树

        有帮助

        说明抑制表达了,可以做内参进行实验

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        在细胞给药后,p65和pp65的剂量依赖性下调,可能说明化合物抑制了NF-κB的表达或活性。

        p65是NF-κB家族的一个亚基,其存在可以激活NF-κB通路,导致其转录活性上升,进而调控细胞内多个信号通路和炎症反应。pp65是p65的一种磷酸化修饰形式,磷酸化状态可以影响p65的转录活性。如果化合物能够抑制NF-κB通路的表达或活性,那么p65和pp65的表达量和磷酸化状态都会受到抑制,从而呈现剂量依赖性下调的趋势。

        至于您的第二个问题,建议您不要以p65作为内参,因为内参应该是稳定表达且不受处理影响的蛋白质。在您的实验中,因为化合物抑制了p65的表达或活性,所以它不再是一个适当的内参。您可以考虑使用其他稳定表达的蛋白质,如β-actin、GAPDH等作为内参。

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