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        WB实验曝光后背景脏以及一些黑点点可能是什么原因导致的?

        user-title

        桃之zbx

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        如图,我的WB跑完曝光后出现了很多不规则的黑点点以及黑乎乎的一片,可能是什么原因导致的呢?


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        6 个回答

        user-title

        dxy_dw727tge

        有帮助

        洗膜时间不够,可以增加洗膜次数或者延长洗膜时间,或者增加洗膜液吐温用量试试

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        不规则的黑点和黑乎乎的一片可能是由于多种原因导致的。

        一个可能的原因是蛋白质本身的污染。如果样品中存在高分子量的杂质,这些杂质可能会在印迹过程中沉积在纸张上,导致不规则的黑点和黑乎乎的一片。如果您发现了这种情况,可以尝试将样品经过超滤或其他方法以去除杂质。

        另一个可能的原因是印迹过程中的问题。例如,如果您在印迹过程中使用了过多的染料或印迹时间过长,可能会导致过多的染料沉积在纸张上。同样,如果您在印迹过程中使用的染料过时或未正确储存,也可能会导致这种情况。

        其他可能的原因包括:放射性染料的污染、蛋白质过度氧化、印迹条件不当(例如温度过高或湿度过低)、仪器故障等。

        建议您仔细检查您的实验过程,尝试确定导致这种情况的具体原因。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        考虑原因:膜上其他部位与一抗或者二抗非特异性结合。

        解决办法:封闭牛奶一定要纯,封闭结束之后要洗,常常是等到要封闭的时候发现没有牛奶,然后匆匆忙忙用PBST/TBST配置,配的匆忙的时候往往不管是否已经完全溶解。


        user-title

        NatureBios

        有帮助

        印迹膜上的黑点,有些是封闭液和抗体稀释液没有充分溶解,黏附到抹上导致的,

        在下面蛋白印迹出现空心属于曝光强度高,ECL底物消耗过快导致的,

        针对第一种,封闭液或抗体稀释液充分溶解

        第二种现象 1 降低上样量,抗体的浓度

        2 让ECL显影液预留一些在膜上去曝光

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        造成背景脏的原因有很多,比如一抗没洗干净,或者二抗没洗干净,还有就是封闭的时候不完全。

        user-title

        申东熙老伯

        有帮助

        背景脏可能是没封闭好,一些黑点可能是活化膜的时候有什么脏东西掉在了上面。

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