一抗敷错了一小时，在4℃，用TBST洗了10分钟有影响吗？

一个小时，抗原抗体已经结合了，清洗不掉的，

这个得看情况，敷错的抗体跟目标抗体是不是同种属的，如果是不同种属就完全没有影响。如果是同种属，那就看两个抗体的靶蛋白位置分不分得开，还有这个蛋白的表达丰富高不高，如果蛋白表达丰度高而且跟目标蛋白位置分不开可能需要用stripping buffer洗脱。

一般不会，用TBST充分洗一下，影响不会太大的。