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        蛋白纯化

        相关实验:免疫球蛋白纯化技术

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        victory40K7

        乳酸菌发酵液经过乙酸乙酯萃取,离子交换层析,RP-HPLC后进行MALDI-TOF质谱检测,检测结果显示聚合物过多,无法确定目的蛋白分子量,有没有大佬知道怎样去除聚合物

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        3 个回答

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        如果质谱检测结果显示聚合物过多,无法确定目的蛋白的分子量,可以尝试以下方法去除聚合物:

        1.增加蛋白质水解步骤。在发酵液中增加蛋白质水解步骤可以切断蛋白质的聚合物,使得质谱检测更加准确。

        2.使用蛋白质纯化技术。可以使用蛋白质纯化技术,如柱色谱、电苯胺凝胶等,去除蛋白质中的聚合物。

        3.使用蛋白质剪接酶。可以使用蛋白质剪接酶,如热心菌肽酶、信使RNA酶等,去除蛋白质中的聚合物。

        4.使用离子交换层析。离子交换层析可以根据电荷来分离蛋白质,可以用来去除蛋白质中的聚合物。

        5.使用抗体。可以使用抗体来结合蛋白质聚合物,从而去除聚合物。

        6.使用溶剂交换法。溶剂交换法可以将蛋白质从一种溶剂中转移到另一种溶剂中,可以去除蛋白质中的聚合物。

        需要注意的是,上述方法并不是万能的,需要根据具体情况来决定使用哪种。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        聚合物一般可以用裂解酶把聚合物的氢键断掉。

        user-title

        简简单单的8872

        有帮助

        排阻色谱可以尝试一下,在适当的时间点只收集你的目的蛋白

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