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        大肠杆菌外源蛋白表达。

        相关实验:用于外源蛋白质生产的细菌表达系统

        user-title

        uuzq

        各位大佬,我用大肠杆菌BL21(DE3)表达外源基因,用的pRSFDuet质粒,T7启动子,用1mMIPTG诱导25℃过夜,跑SDS没有发现目的条带,外源基因插入的位点也是参考的文献,做了密码子优化,不知道是啥原因,插入的两个基因都没表达

        wx-share
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        4 个回答

        user-title

        dxy_0mli503w

        有帮助

        确实是要先测序的,一般来说实验室做好之后都会先送给公司帮忙测序,得到序列之后自己先分析一遍,是否与设计组有偏差,正反双链是否有问题,引物启动子序列表达是否有问题,确定了这些之后才会进行下一步。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可以尝试更换引物,有的时候引物不正确基因也不表达。

        user-title

        简简单单的8872

        有帮助

        序列插入后是否测序?测序正确才可用于表达。若测序无误,可尝试降低IPTG 浓度

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        先确定你的质粒构建没有问题,尤其是在质粒的插入位点。

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