如何避免昆虫组织蛋白样品的降解？
桃之zbx
每次做WB实验的时候 我会把冻在-40℃的蛋白样品取出，磨碎后加上裂解液，金属浴95℃煮20分钟。煮过后的样品用完了继续放回-40℃里面，下次跑WB的时候直接取。但是用了几次就会发现蛋白样品降解了，所以想请问一下大家，我的操作方法有没有什么改进，可以减慢样品的降解呢？煮好的蛋白样品一般可以用几次呀？
5 个回答
whilt-shirt
有帮助
加入蛋白酶和磷酸酶抑制剂，这样可以有效延长样本使用时间
dxyc42u
有帮助
我们平时提蛋白的话，是把蛋白煮了再冻存
天一湖医者
有帮助
尽量操作环境保持低温（如相关的器材预冷），添加合适的蛋白酶抑制剂，特别是在细胞或组织破碎的过程中要注意环境低温。
木木的虾
有帮助
我们用的脂肪体，提蛋白时会在裂解液中加蛋白酶抑制剂(你可以试一下好一点的cookie),提完之后加入SDS上样缓冲液煮沸，然后放入-20.
简简单单的8872
有帮助
可以在裂解液中添加蛋白酶抑制剂，蛋白样品煮沸后分装，可多次使用
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