dxy_03ip9wor
最近在跑一个多克隆抗体(这个指标目前只有多克隆的,没有单克隆的),且这个抗体是一个泛素化连接酶。
WB条带如下:
所用一抗浓度是1:1000,用的TBST稀释
封闭10%脱脂牛奶2h
求助各位大佬:
1.这种指标在制备蛋白样品时需要注意什么吗?
2.对于这种杂带有什么改进意见呢?
wildC8OG
延长封闭时间,降低一抗浓度,增加二抗浓度
juyue2010
一抗稀释不够,浓度太大,适当延长封闭时间,降低1抗浓度
土井挞克树
杂带太多与稀释液有关系。可以用5% 脱脂奶粉封闭,一抗浓度:1.0 mg/mL,溶于 5% 脱脂奶粉和 0.5M NaCl。
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