WB背景较深，非特异性杂带很多，科研小白求助各位大神！
dxy_03ip9wor
最近在跑一个多克隆抗体（这个指标目前只有多克隆的，没有单克隆的），且这个抗体是一个泛素化连接酶。
WB条带如下:
所用一抗浓度是1:1000，用的TBST稀释
封闭10％脱脂牛奶2h
求助各位大佬:
1.这种指标在制备蛋白样品时需要注意什么吗？
2.对于这种杂带有什么改进意见呢？
3 个回答
wildC8OG
有帮助
延长封闭时间，降低一抗浓度，增加二抗浓度
juyue2010
有帮助
一抗稀释不够，浓度太大，适当延长封闭时间，降低1抗浓度
土井挞克树
有帮助
杂带太多与稀释液有关系。可以用5% 脱脂奶粉封闭，一抗浓度：1.0 mg/mL，溶于 5% 脱脂奶粉和 0.5M NaCl。
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