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        小分子量蛋白WB求助

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

        user-title

        dxy_rvidsskw

        请求WB大神降临

        我的蛋白分子量11KDa

        电泳条件80V,1小时,跑到marker刚刚分开就停下。溴酚蓝指示带大概在胶的下三分之一的位置。

        转膜条件200ma.90min

        显影后,目的条带呈现波浪状,不直还连在一起。头疼

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        4 个回答

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        用15%的胶,别的条件不变再跑跑看,感觉你用的是10%的胶。

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        看你的marker都已经有弥散了,如果不是泡的时间久,就换一种loading吧,然后用15%的分离胶或者用商品化的梯度胶,4%-20%的那种,小分子可以跑得很好

        user-title

        dxy_rvidsskwuser-title

        你好,我用的就是4-20的梯度胶,loading用的是康为世纪

        user-title

        冷泉港蛋白

        有帮助

        有些弥散,换种凝胶。

        常规的 Tris-SDS-PAGE 电泳只能分辨大分子蛋白,对于相对分子量小的,尤其是 10 kD 以下的蛋白分辨率极低。而 Tricine-SDS-PAGE 可以很好的分离分子量在 1-10 kD 的蛋白

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        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        可以用12%的胶和0.22um的膜

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