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        蛋白提取SDS-PAGE相关问题?

        相关实验:单向聚丙烯酰胺凝胶电泳实验

        user-title

        lyang556

        最近一直跑sds-page,maker相对很清晰,但是蛋白条带很弱,不知道什么原因,是蛋白含量太低吗?

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        7 个回答

        user-title

        申东熙老伯

        有帮助

        可能是蛋白浓度太低,浓缩一下试试。

        user-title

        inventbiotech

        有帮助

        蛋白跑电泳前最好测一下浓度,这样跑电泳时心里就有底了,marker跑的清晰那是因为marker每条带的定量以及总体的定量都是定好的,而且组成单一,跑出来清晰是必然的。自己的蛋白提取样品要想跑的好看清晰,要在提取蛋白的方法上改进(建议可以尝试柱式法蛋白提取法),蛋白拿到后进行BCA精确定量,20-30ug每孔,后期跑电泳会很漂亮

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        可能是你的目的蛋白表达量很低,也可能是你提蛋白没有冰上操作发生降解了。

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        如果所有的蛋白条带都弱,那就是上样量少了。

        user-title

        汤姆卜丽波

        有帮助

        有蛋白表达不高的原因,也有可能是你在提取过程中蛋白降解,或者孵育时间不够

        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        有可能是蛋白含量低导致的,建议增加上样量

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        条带弱一般是因为表达量低,或者一抗的问题,比如质量不好或浓度太低或孵育时间太短。

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