• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        SDS-PAGE电泳实验相关问题?

        相关实验:单向聚丙烯酰胺凝胶电泳实验

        user-title

        浪子在天涯

        最近做sds聚丙烯酰胺凝胶电泳实验,目的蛋白质条带模糊,凝胶浓度和蛋白质样品应该都没有问题,这种情况应该如何改进?

        wx-share
        分享

        4 个回答

        user-title

        府宅

        有帮助

        1.缓冲溶液、SDS都要新鲜配制。

        2.避免加样过多,提高分辨率。小体积样品可给出窄带,加样体积根据样品浓度和凝胶厚度灵活掌握。一般上样体积为10-15uL(即2-10ug蛋白质)。

        3.加热变性后的蛋白质样品要放置到室温即电泳,不要久放,因为蛋白质的二硫键在高温下可能是会断开,但是暴露于空气中温度降低会重新形成二硫键,而且可能在过久放置过程中蛋白质可能会再折叠,更不要扔到冰箱里保存。

        user-title

        dxy_gwrp7ndq

        有帮助

        1.低于10Kd的小分子蛋白质要用Tricine胶。

        2.靠近前沿的电泳带分辨率不佳。根据分子量与凝胶孔径的关系,选择适当浓度的凝胶。

        3.蛋白质样品水解。注意除去蛋白质样品的内源性的水解酶,不要反复冻融。

        4.电泳时间过长或过短。溴酚蓝达到分离胶的底部即应该关闭电泳电源。

        user-title

        云潇之潋

        有帮助

        样品浓度和量够的情况下,选择合适的电泳电流或电压,如果是小分子目的蛋白,可调整浓缩胶和分离胶的比例,加长预电泳时长

        user-title

        Kimser

        有帮助

        是不是胶没凝好?考虑一下延长一下凝胶时间,30min试试,大概中间有折射线时候再倒,然后再用吸水纸擦擦

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序