ECL检测后胶片显影之后曝光，胶片上面没有蛋白，原因有什么啊，压片10min，显影定影2min，胶片上什么也没有

先确认蛋白是否转到了膜上，转膜后用丽春红染色可以检验，转膜后的胶可以用考马斯亮蓝染色，看看胶上是否还有蛋白，通常情况下，胶上还有蛋白的概率是很大的。每一步都有质控步骤，然后推导，找到原因是关键

有可能是一抗二抗没敷好，建议重复试试

你加发光试剂以后，看到发光的条带了么？另外你的显影液有没有坏掉啊？

可适当延长曝光时间。如果还是不行，增加蛋白的上样量，增加抗体的用量，同时设立相应的对照，确认实验过程的有效性。