目标蛋白大小在15-20KDa，半干法转膜55min，转完膜的胶用考马斯亮蓝染色发现蛋白还在胶上，但是marker已经转到膜上了

转膜液很关键，转膜液这么小的蛋白SDS还是要控制量，转膜液选好了之后，转膜时间，选一个彩色maker做标志，但是maker过去了蛋白不一定过去，但是marker没过去，蛋白一定没过去

半干转的话，你是不是滤纸太大了，两片滤纸粘一起，短路了。我觉得你小蛋白可以用湿转试一试，效果特别好。

你电压多少？考虑在转膜液中加点sds吧

可以调整一下转膜条件。转完膜后将胶用考马斯亮蓝染液染一下，再脱色，看看胶上是否残留蛋白。如果残留太多，说明转膜时间不够或电流太低；残留少的话，说明蛋白转丢了，可以将电流调低或时间缩短