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        免疫沉淀IgG出现条带怎么改进?

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        决明5FU2

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        3 个回答

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        Eason老歌迷

        有帮助

        珠子少加点,wb抗体稀一点,曝光时间短一点。珠子抗体这些不要贪多,不然容易有非特异性条带

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        天一湖医者

        有帮助

        加入的A蛋白抗体和IgG 抗体,在最后一步的煮样中,被β巯基乙醇破坏了结构,变成了重链和轻链,随后由于A蛋白抗体和你的B蛋白抗体种属来源相同,又被你的B蛋白抗体识别出来,所以显影就出现了条带。

        user-title

        府宅

        有帮助

        可以采用抗体特异性封闭的方法进行封闭!方法如下:

        1 常规电泳转膜

        2 利用抗FC片段抗体进行封闭重链的条带

        3利用抗Fab片段的抗体进行轻链封闭

        4 加一抗进行杂交

        5 洗涤加二抗进行杂交

        6 显色即可

        注意事项 封闭用的抗体不可和杂交用的一抗同源!

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