目的条带时而清晰，时而不存在怎么办？一样的实验条件

一时可以检测到一时检测不到，可能是样品在进行蛋白抽提时有蛋白丢失导致的，尤其是目标蛋白定位于细胞膜细胞器细胞核等位置上的蛋白，容易发生丢失。当然还有有可能是转膜失败，WB检测过程可以设置质控点，丽春红染色检查转膜是否成功。一步步分析看看原因出在哪里，如果是不是WB检测的问题，那就是蛋白提取的问题，如果是的话，建议使用柱式法总蛋白进行蛋白提取，可以解决这个蛋白丢失问题

那肯定就是你转膜没转好，或者是你孵育抗体没孵育好。

条件不稳定，建议复盘整个实验过程，查找原因

1.可能转膜的夹子有问题了，2，可能抗体有问题了。