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        关于WB电泳的若干疑问

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        周末也要努力呀

        如图,好多疑问希望解答,感谢!

        1.快速制胶,普通分开配置浓缩胶分离胶,预制胶。三者跑出来的条带有差异嘛?自己配胶是在费时间,请问跑出条带质量好的前提下选哪个?

        2.小分子20左右,每次转膜都是marker转上去了,蛋白爆不出来,没转上去?小分子转膜注意什么问题呢?

        3.现在期刊要整张图原始材料。请问如果一次跑多个蛋白,反复洗脱抗体不会造成曝光结果与实际不一样吗?大家对这个如何处理呢?

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        3 个回答

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        Eason老歌迷

        有帮助

        第一个问题,我用过预制胶和自己配的胶,我个人还是更喜欢用自己配的,感觉效果更好,当然前提是你一定要混匀。

        第二个问题,小蛋白在转膜时一定要注意控制时间。一般湿转半个小时即可。

        user-title

        秋秋欣欣

        有帮助

        如果自己配胶技术没有问题的话建议自己配更好一些,如果曝光没有条带可以试试用丽春红染膜,膜上有没有蛋白,从而判断是哪里出了问题

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        bamboopiggy

        有帮助

        1,只要你能灌匀了,灌的胶和预制胶没有啥区别,就是便宜。

        2.你20kd的蛋白爆出出来,你确定抗体好使?如果抗体好使,建议你换0.2的膜试试。

        3.不建议striping,striping以后的条带不可信

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