请问各位大神，磷酸化pi3k（分子量85）跑出来泳道背景很深
AttemptO0CH
80v转120v，湿转200mA，1.5h，5％BSA封闭3h，一抗1:1500(推荐1：500-1：2000)4℃过夜，二抗1:5000，1h,洗膜都是15min,5次，之前也试过稀释抗体以及延长封闭时间，好像没多大用，样品处理也加了磷酸化酶抑制剂，请各位大神指教！！
2 个回答
bamboopiggy
有帮助
你试试用5%的脱脂牛奶封闭看看，可能会好一些
Eason老歌迷
有帮助
你试一试封闭时间短一点，现在都夏天了，封闭时间缩短一点。然后抗体孵育时间也缩短。
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