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为什么我跑了几次lc3蛋白,显影总是白膜一张?

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Eason老歌迷

lc3是不是蛋白大小太小了?

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4 个回答

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inventbiotech

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如果是整体白膜,那应该往回推导转膜后,是否丽春红染色,看一下转膜效率,白膜大概率是转膜失败,但是通常LC3检测,小分子量蛋白比较难做,但是LC3-I处于细胞质中游离还是比较容易获取的,但是自噬时形成的脂质化修饰的LC3-II因为已经成膜结构,不易获取,普通蛋白提取方法会造成LC3-II的丢失,WB检测自然就检测不到。做LC3自噬研究提取蛋白建议使用柱式法总蛋白提取,可以有效降低因蛋白丢失引起的WB检测失败

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秋秋欣欣

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Lc3蛋白分子量较小要用浓度高一些的分离胶,然后适当增加上样量,太少估计就跑不出来

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balalaLy

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lc3分子量大概在17的位置,用15%的分离胶。显影什么都没有可能是你的抗体问题。

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bamboopiggy

有帮助

lc3大概在17kd左右,您最好用15%的胶来跑,转膜时间控制在400mA,1小时就可以。

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