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        蛋白质免疫印迹实验中wb转膜问题

        user-title

        CICIkylin

        1. Wb转膜时,现在还能切膜嘛?有的杂志需要提供全部膜,那么是否需要全部转膜么?
        2. 膜背景脏乱应该怎么处理呢?我看原因有可能是一抗没有洗干净,可是已经洗了3.4遍,应该不是这个问题
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        4 个回答

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        转膜的时候可以切膜,我们都是切开的。当然你也可以不切,这样的话,你就是一起孵抗体,这样的话就是比较费抗体。

        你的背景比较脏,建议你增加封闭时间,或者是你封闭液取上清,别混沉淀。

        user-title

        dxy_stgshtu2

        有帮助

        问题1:建议在转膜之前把膜剪好,需要多少泳道(包括marker),至于杂志上需要全部膜应该是不接受只剪自己条带位置的那一小块儿膜吧

        问题2:背景脏的话,建议用5.2%的脱脂奶粉37度80rpm封闭一小时

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        1.可以切膜,但是膜的上下边要留大一点。2.如果膜的背景脏,可能是抗体的特异性不好

        user-title

        申东熙老伯

        有帮助

        膜背景脏还有可能是封闭的不好,建议封闭液用5%的牛奶现配现用。

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