即使两次的上样量相同，但是内参却不一样，是为什么？上样过程都是一样的

其实你觉得你上的一样，还是有误差的，只要趋势一致，或者是比值差不多就可以了。当然还有一种情况就是蛋白降解了。

有没有试试别的蛋白 看看是不是制胶电泳转膜那一套有没有出问题。

是会这样的，尤其是生手操作过程不是特别稳定，会有这样的误差，所以要跑多两次