WB 内参问题 为什么两条带？

1.GAPDH抗体的特异性不好，出现杂带2，running buffer是否弄错了。3，转膜时，是否胶变性了。

样品反复冻融过吗，有可能蛋白降解了。

原因很大，比如：

1.多克隆抗体，抗体的特异性较差；2.调整抗体浓度，降低1抗浓度试试；3.延长封闭时间；4.发现新的亚型