请问这是什么原因造成的呀，好多杂带

细胞系传代次数过多，蛋⽩表达谱发⽣变化；与细胞系裂解物相⽐，原代细胞或组织提取物会倾向于有较⾼的背景和降解条带；⽤去垢剂含量较⾼的RIPA buffer裂解组织，可得到裂解更彻底、⼀致性更⾼的裂解物；蛋⽩被降解；蛋⽩本⾝有很多修饰；所检测蛋⽩存在多种剪接体，导致分⼦量⼤⼩不同。

感觉要么是样品降解了，要么是抗体不特异

1）目的蛋白有多个修饰位点，本身可以呈现多条带，建议查阅文献或进行生物信息学分析，获得蛋白序列的修饰位点信息，通过去修饰确定蛋白实际大小

2) 样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂；样本处理时在冰上操作

3）杂蛋白多，建议处理目的蛋白

4）抗体特异性不强，建议使用特异性强的抗体

5）抗体孵育时间过久，建议减少抗体孵育时间

6）二抗与抗原有交叉反应，建议选择合适的封闭物

7）二聚体或多聚体存在，建议增加蛋白质变性过程及强度

8）底物显色与曝光时间过长，建议缩短显色及曝光的时间