实验过程中，切片边缘总是着色，怎么避免呢？

你的试剂有没有充分覆盖标本组织?超出组织边缘2mm试一试

1.在滴加过氧化酶试剂封闭非特异性抗体和时候，尽量保证能够覆盖全部标本区域，并且注意湿盒的孵育条件，如果切片边缘容易蒸发产生干裂，适当扩大封闭的范围。

2.加一抗后是否可以适当减少孵育的时间，防止边缘试剂蒸发导致浓度偏高、染色过深。也可以尝试增加湿盒的湿度避免以上现象。

3.注意显色试剂的作用时间，避光反应以免引起非特异性着色。

4.制片后尽快观察结果，防止在空气中暴露时间太长影响结果判读。

用多聚赖氨酸处理过的玻片捞片，加抗体是覆盖整片，注意放在湿盒中

解决措施：组织的前期处理应规范，试剂要充分覆盖组织，尽量避免选用坏死较多的组织。

切片边缘着色切片边缘着色也是一种常见的现象，这种现象称为边缘效应。产生的原因：（1）组织边缘与玻片粘贴不牢，边缘组织松脱漂浮在液体，每次清洗不易将组织下面试剂洗尽所致。解决办法：制备优质的胶片（APES或多聚赖氨酸），切出尽量薄的组织切片，不厚于4微米，组织的前期处理应规范，尽量避免选用坏死较多的组织。（2）切片上滴加的试剂未充分覆盖组织，边缘的试剂容易首先变干，浓度较中心组织高而致染色深。解决办法：试剂要充分覆盖组织，应超出组织边缘 2mm。用DAKO笔画圈时，为了避免油剂的影响，画圈应距组织边缘3-4mm。3、“阴阳脸”着色指组织一半着色一半无着色，形成交界清晰或不甚清晰的两种染色结果。其成因是试剂仅覆盖了部分组织而不是全部。如加试剂后未让试剂流散开而集中在部分组织上。通常应该在加完试剂后，仔细看一遍，是否有的组织未被试剂完全覆盖，如有这种情况，建议用牙签而不是用吸头或试剂瓶口将试剂引流开使之将组织全部覆盖。