武金亮wu
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检查你的梳子,很可能是没有洗干净导致点样孔内有杂质造成条带弥散。还有是你的胶融化的不充分,或者凝结不充分。请保证煮沸两次以上。凝固时凝固半小时以上。
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你说的是某个孔,跑下来的条带宽吧?可能是你的样品浓度有问题。那个孔的样品浓度大了。灌胶,一般不可能从上到下的影响一条泳道,电泳液的话,反复用三次,没问题。
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胶的原因大一些,电泳液的原因较小
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有三种可能的原因。
1.电泳缓冲液用的次数过多,一般来说电泳缓冲液用过两次以后电泳的效果就会变差。
2.电泳的浓缩胶和分离胶缓冲液的PH没有调好或浓度没有调好。浓缩胶和分离胶胶浓度的变化和PH的变化让电泳样品压缩在一起。一般情况下浓缩胶缓冲液(Tris—HCl,pH6.8)、分离胶缓冲液(Tri s—HCl, pH8.8)。
3.提取的粗蛋白样品里面有杂质,细胞里面除了含有蛋白质还有核酸、多糖、纤维素等大分子,这些大分子浓度较高时会使样品黏连,造成条带跑的不够整齐
天一湖医者
如果分离胶和浓缩胶配制正常的话,很有可能是你在处理蛋白样品的时候出了问题。