小分子蛋白的WB要怎样跑？

最近想要跑小分子蛋白(4-5kDa)，试过普通的Glycine SDS PAGE没有条带；也试过tricine SDS PAGE多肽有条带，但是细胞过表达样品没有条带；最近在网上看到有人说Bis-tris PAGE可以跑，所以自己配制了体系(如图)，但是细胞过表达样品依旧没有条带，收细胞前看了荧光确认质粒成功过表达了，但是阳性对照的多肽样品有条带，分辨率可以达到0.022ug。不知道过表达的样品能不能达到这么多蛋白量。求问有没有跑过小分子蛋白胶的，可以分享一下经验吗？