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        蛋白质在纯水或低盐溶液中溶解度较低,影响盐析沉淀的因素有哪些?

        相关实验:蛋白质的定量测定实验

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        君君子丶

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        6 个回答

        user-title

        小布丁瑶瑶

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        蛋白质水化膜;
        蛋白质带电荷性可以影响

        user-title

        dxywode

        有帮助

        高浓度蛋白溶液可以节约盐的用量,但许多蛋白质的b 和Ks常数十分接近,若蛋白浓度过高,会发生严重的共沉淀作用;在低浓度蛋白质溶液中盐析,所用的盐量较多,而共沉淀作用比较少,因此需要在两者之间进行 适当选择。用于分步分离提纯时,宁可选择稀一些的蛋白质溶液,多加一点中性盐,使共沉淀作用减至最低限度。一般认为2.5%-3.0%的蛋白质浓度比较适 中。一般说来,离子强度越大,蛋白质的溶解度越低。在进行分离的时候,一般从低离子强度到高离子强度顺次进行。每一组分被盐析出来后,经过过滤或冷冻离 心收集,再在溶液中逐渐提高中性盐的饱和度,使另一种蛋白质组分盐析出来。蛋白质所带净电荷越多溶解度越大,净电荷越少溶解度越小,在等电点时蛋白质溶解度最小。为提高盐析效率,多将溶液PH值调到目的蛋白的等 电点处。但必须注意在水中或稀盐液中的蛋白质等电点与高盐浓度下所测的结果是不同的,需根据实际情况调整溶液PH值,以达到最好的盐析效果。

        user-title

        dxyv9281

        有帮助

        1.蛋白质浓度

        高浓度蛋白溶液可以节约盐的用量,但许多蛋白质的b 和Ks常数十分接近,若蛋白浓度过高,会发生严重的共沉淀作用;在低浓度蛋白质溶液中盐析,所用的盐量较多,而共沉淀作用比较少,因此需要在两者之间进行 适当选择。用于分步分离提纯时,宁可选择稀一些的蛋白质溶液,多加一点中性盐,使共沉淀作用减至最低限度。一般认为2.5%-3.0%的蛋白质浓度比较适 中。

        2.离子强度和类型

        一般说来,离子强度越大,蛋白质的溶解度越低。在进行分离的时候,一般从低离子强度到高离子强度顺次进行。每一组分被盐析出来后,经过过滤或冷冻离 心收集,再在溶液中逐渐提高中性盐的饱和度,使另一种蛋白质组分盐析出来。

        离子种类对蛋白质溶解度也有一定影响,离子半径小而很高电荷的离子在盐析方面影响较强,离子半径大而低电荷的离子的影响较弱,下面为几种盐的盐析能 力的排列次序:磷酸钾>硫酸钠>磷酸铵>柠檬酸钠>硫酸镁。

        user-title

        dxy_gwrp7ndq

        有帮助

        PH值:

        蛋白质所带净电荷越多,溶解度越大。净电荷为零时,溶解度最低。一般将PH值调到蛋白质等电点附近,这样有利于盐析。

        温度:

        低离子强度或水中,在一定范围内蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大。高盐溶液中,蛋白质的溶解度随着温度的升高有时反而下降。一般情况下在0~4℃操作。

        user-title

        府宅

        有帮助

        1、蛋白质浓度:

        蛋白质浓度过大,盐析时发生共沉现象,分离效果不好。蛋白质浓度太稀,耗盐量过大,蛋白质回收率低。一般蛋白质浓度在2.5%~3.0%较适中。

        2、离子强度:

        离子强度越大,蛋白质的溶解度越低,越容易产生盐析现象。

        3、离子类型:

        离子半径小而价数高的离子,对盐析影响较强。离子半径大而价数低的离子,对盐析影响较弱。

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        蛋白质的浓度。离子强度。盐的性质。PH值。温度。

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