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        Western Blot杂带太多的原因是

        相关实验:快速蛋白质斑点印迹试验

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        小布丁瑶瑶

        Western Blot杂带太多的原因是

        wx-share
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        6 个回答

        user-title

        今天摆烂了咩

        有帮助

        杂带多的原因——上样量过高,蛋白样本降解,蛋白本身有多个修饰位点,抗体未纯化,一抗浓度过高,洗涤不完全,封闭不好等都可能导致杂带产生。

        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        原因有很多,1)封闭时间过短;2)一抗敷育时间过长或特异性不好;3)二抗不匹配

        user-title

        君君子丶

        有帮助

        1、封闭问题,可以选择牛奶封闭,并且封闭时间可以延长,4℃过夜都是可以的。

        2、抗体的非特异性过高,选择特意性强的抗体,单克隆抗体比多克隆抗体好。

        3、蛋白质降解。

        4、蛋白质亚型也一起曝出来。

        user-title

        府宅

        有帮助

        上样量过高,太敏感,适当减少上样量。

        一抗特异性不高重新选择或制备高特异性的抗体。

        一抗不纯,要纯化抗体

        一抗或者二抗浓度偏高,要降低抗体浓度。

        user-title

        dxy_gwrp7ndq

        有帮助

        目的蛋白有多个修饰位点(磷酸化位点、糖基化位点、乙酰化位点等),本身可以呈现多条 带。查阅文献或进行生物信息学分析,获得蛋白序列的修饰位点信息,通过去修饰确定蛋白实际大小。

        目的蛋白有其它剪切本查阅文献或生物信息学分析可能性。

        样本处理过程中目的蛋白发生降解加入蛋白 酶抑制剂;样本处理时在冰上操作。

        user-title

        dxywode

        有帮助

        可能是多克隆抗体,可选择更换为单克隆抗体

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