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提取的蛋白保存后没有凝固呈水状的原因

28 个回答

是小杨同学

2022-01-20

有帮助

我觉得有可能是污染了，或者是冰箱温度的问题，建议放在-80°C冻存呢

lzy必有我师

2022-01-20

有帮助

1.检查冰箱温度，可能是保存时冰箱门处于开的状态，温度高未抵达凝结状态，2，是提取过程没有处于低温，又污染其他杂质导致提取物呈现不一样的颜色。3检查离心管的洁净程度，离心机的温度，提取时的温度及时间 4没有凝固可能是裂解液的问题，建议新配置裂解液。。

dxyhsx123

2022-01-20

有帮助

应该是存在污染，蛋白在提取时候，注意规范，适当增加一步漂洗。

内科小护士

2022-01-19

有帮助

可能是微量的蛋白在冻干过程中沉积在管内，形成很薄或肉眼不可见的透明蛋白层。

dxy_pggo2lp2

2022-01-19

有帮助

1.可能是提取过程没有处于低温，又污染其他杂质导致提取物呈现不一样的颜色。可以检查离心管的洁净程度，离心机的温度，提取时的温度及时间 2.没有凝固可能是裂解液的问题，建议新配置裂解液。2.检查冰箱温度，可能是保存时冰箱门处于开的状态。

JCorona

2022-01-19

有帮助

极可能是污染了，很多溶质都可能导致溶液的冰点降低，所以-20℃无法凝结。砖红色沉淀可能是铜离子或者铁离子导致的

医往情深丁香园

2022-01-19

有帮助

在冻干过程中沉积在管内，形成很薄或肉眼不可见的透明蛋白层。

dxy_qkedgrg7

2022-01-19

有帮助

应该是有杂质，正常来说蛋白放-20是可以很快凝固的，如果还是水状并且有红色，可能是细胞提取时没洗干净，培养基的残留之类的

vae1476

2022-01-19

有帮助

细胞裂解前要用pbs洗干净，裂解要充分，怀疑引入杂质了

ZZDX-YILILI

2022-01-19

有帮助

1.当时提取完蛋白质加入loading budfer的时候是否涡旋混匀了。 2.看到你说当时提取的时候有砖红色，怀疑是不是没有清洗干净培养基，影响后续的裂解。

dxy_bq4uxnd

2022-01-19

有帮助

变性蛋白一般放在-80℃冰箱比较保险，有两管没有凝固，其他凝固了，说明蛋白提取的过程应该是没有问题，离心过后有砖红色沉淀，可能是操作时污染了。

一支肾上腺素

2022-01-19

有帮助

可能是由于温度没有达到，把温度调到4度，再试一次。

水深先试浅

2022-01-18

有帮助

细胞量多吗，怕你蛋白浓度太低了，造成的

dxy_h7vcp8v3

2022-01-18

有帮助

没有凝固，可能是因为-20冰箱时常有人开关，温度一直变动，因此未凝固。其二可能是因为你拿的时候，别人吧-20冰箱打开了，造成你的样品未冻实。建议，蛋白保存前用液氮速冻，然后冻于不经常开关的冰箱。。出现砖红色，其一如果蛋白浓度过高，出现红黄色；其二自己蛋白本身显砖红色。其三，提取过程中杂质污染。可能纯化柱带了以前纯化的红色蛋白。建议，换新纯化柱进行实验，后续进行浓度检测。进行跑胶检测。