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电泳,有时抛出两条条带,有时是一条条带,两条条带分子量相差不大,可能是什么原因造成的?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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liulang29

如题,请问可能是什么原因造成的?如何解决?多谢!
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3 个回答

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张振1986

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原因主要有:1、配胶的问题,配胶时没有将胶完全混匀,蛋白分离不彻底造成的。2、抗体的原因,不知道你用的是单抗还是双抗。3、是否是稳定电压下跑出的,确保电压的恒定。4、蛋白自身的问题,是否有降解,是否分子量接近,抓紧尝试一下,祝你早日跑出理想结果。
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临药饼饼

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有可能你的抗体是多克隆抗体,而不是单克隆的。
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hl16010921

有帮助
1.电泳的原因,相差不大的蛋白有时没有分开。染色,脱色未到最佳等。就是两条带没分开,或丢失一条。 2.样品原因。部分降解,修饰(磷酸化,乙酰化等),相近蛋白的干扰。 3.样品原因的话,某一样品结果是不可逆的,一条带变两条,而后该样品一直是两条带。电泳的问题是随机的,忽而一条,忽而两条。 4.电泳,问题可能大。稳定电泳条件,特别是防止局部过热。
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