原核表达目的蛋白分子量小于GST标签蛋白是为什么？
bylvjing
我现在在做原核表达，表达条件应该没有问题，我们做过各种条件的摸索，还是多数以包涵体形式存在。我们的目的蛋白分子量小于GST标签蛋白，是不是这个原因导致的？谢谢！！
3 个回答
detaibio
有帮助
原核蛋白表达与纯化实验所表达的目的蛋白大多数是以包涵体的形式表现，有些蛋白可以通过降低温度，加快实验速度来改变表达情况，使蛋白表达为可溶性上清蛋白，但是最有效的还是做包涵体复性，这是比较稳妥的，可获得可溶性蛋白的方法，只是活性上会有所降低。
dididada
有帮助
目的蛋白是否以包涵体表达：主要与目的蛋白本身的性质有关。如果二硫键较多，基本上用什么标签都不行，只能以包涵体表达。
shashababy
有帮助
降低IPTG浓度是没有用的，不过降低温度，将至18度最低可以。
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