实验问答21,943,234 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问请问跑Wb时，marker下半部分消失

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问用荧光酶标仪测细胞活性氧的荧光值一般是多少，怎样判断这个数值是否正常。贴壁细胞如果需消化下来，如何保证细胞消化完全，又不损害细胞。

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问ip 实验求助！input组目的蛋白为双条带，ip组拉下来是单条带！

百泰派克-李工

在免疫沉淀（Immunoprecipitation, IP）实验中，如果在input（输入）组中观察到目标蛋白为双条带，而在IP组中只拉下单条带，可能是由于：1、蛋白修饰：在Input组中，目的蛋白可能存在不同的翻译后修饰形式（如磷酸化、糖基化等），导致电泳迁移速度不同，形成双条带。而在IP组中，可能只有一种形式的蛋白被特异性抗体识别并沉淀下来。2、蛋白降解：在Input组中，双条带可能是由于蛋白

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问冷冻保存时间较长的样本还能进行elisa吗？

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问原核表达需要去掉信号肽？

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问小鼠腓肠肌，比目鱼肌以及股四头肌如何提取

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问请问有人用过酶免的Elisa试剂盒吗？今天做了三遍，测不出来梯度有点问题，想问问是试剂盒的问题吗？或者有好用的试剂盒推荐吗？谢谢

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问流式检测破骨细胞用哪些位点比较好

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问想问一下wb出现这种情况是什么问题?

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问蛋清溶液中加入醋酸会不会变性

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问bca很齐但是wb内参不齐？

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问wb实验转膜后出现这个情况是啥原因啊，而且显影显示好像蒙上一层东西，求助

102 围观

问您好，注射烟草时的混合菌液只需要nluc与cluc对应的重组蛋白两种菌液混合对吗？不需要P19吗？

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问超声破碎细胞后，目的蛋白在沉淀中大量富集。

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问BLM诱导肺纤维化模型小鼠，肺泡灌洗后的肺可以做HE和马松染色吗？剩余的肺可以用来测WB吗？

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问求助！为什么转膜槽会发白？？？

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问wb在转膜过程中电压如果过低会导致什么结果

百泰派克-李工

1.转移效率低下：电压是推动膜材料从一个表面转移到另一个表面的驱动力。如果电压太低，可能不足以有效地完成这个过程，导致转移效率降低。2.不均匀的转移：由于电压不足，膜材料可能无法均匀地转移，这可能导致转移后的膜出现厚薄不一、缺陷或瑕疵等问题。3.膜质量差：膜的完整性和均匀性对于其性能至关重要。电压过低可能导致膜的质量不佳，从而影响其最终的应用性能。4.时间延长：在某些情况下，如果电压太低，可能需要

1 回答368 围观

问如何根据图谱看蛋白大小

百泰派克-李工

在进行SDS-PAGE时，通常会在凝胶的一侧跑一个分子量标准（Molecular Weight Marker），这是一系列已知分子量的蛋白质。这些标准蛋白质在电泳后会形成一系列条带，每个条带对应一个特定的分子量。将样品和分子量标准一起进行SDS-PAGE电泳，电泳结束后，观察样品在凝胶上的迁移位置，并与旁边的分子量标准比较。根据样品蛋白条带与分子量标准条带的相对位置，可以推断出样品蛋白的大致分子量

1 回答557 围观

问请问跑泛素化应该配多大浓度的胶，转膜的电流大小及时间是多少，以及PVDF膜用0.45还是0.22？

百泰派克-李工

1、凝胶的浓度：对于大多数蛋白质，使用 8-12% 的SDS-PAGE凝胶是比较常见的。如果目标蛋白较小（<20 kDa）或者非常大（>200 kDa），可能需要使用更高或更低浓度的凝胶。2、电泳的电流和时间：通常情况下，电泳的电流设置为常电流（constant current）模式，电流大小一般为 15-25 mA（每个凝胶槽）。电泳时间取决于凝胶的厚度和蛋白的大小，通常在1-2小时

1 回答1418 围观

问肠激酶切割体系缓冲液具体配置方法？

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