丁香通
丁香园
论坛
医药招聘
丁香医生
更多
调查派
用药助手
丁香搜索
医药数据库
来问医生
我要登录
|
免费注册
|
我的丁香通
企业机构:
成为企业机构
个人用户:
个人中心
移动端
搜实验
大家都在搜
大家都在搜
0 人通过求购买到了急需的产品
免费发布求购
搜索
发布求购
实验专区
实验库(10000+)
实验问答
实验专题
热门视频
前沿资讯
科研者之家
丁香通
>
实验专区
>
实验问答
>
蛋白质
实验问答
23,406,569 科研人在看
科研学霸天团,48小时有问必答
我要提问
全部
细胞
免疫
蛋白质
PCR
DNA
RNA
微生物
动物
遗传
生物信息
其他
问
WB显影时内参蛋白有条带,但是目标蛋白没有,显示信号弱出不来条带,有什么解决的办法吗?之前显出来过一次,还是同样的条件就不行了
whilt-shirt
增加目的蛋白一抗浓度或者换用1.5mm的胶增加上样量试试
3 回答
959 围观
3 回答
959 围观
去回答
问
超滤后废液有目的蛋白
Eason老歌迷
要是没有特别的破损,你可以试一试清洗下。随着超滤过程的进行,在膜表面逐渐形成凝胶层,使透过通量下降,当通量达到某一最低数值时,就需要进行冲洗,这段时间成为运行周期。运行周期的变化与清洗情况有关。可以使用 0.1-0.5 M NAOH清洗。
2 回答
631 围观
2 回答
631 围观
去回答
问
WB煮蛋白的温度和时间
balalaLy
5-10min,95-100度,这个范围内都可以
4 回答
7936 围观
4 回答
7936 围观
去回答
问
请教:这种想法是否用蛋白组学测序 即可实现?
Eason老歌迷
思路是没问题的。不过需要注意两点。一个是标本量要多,第二个是要设置重复性实验
2 回答
357 围观
2 回答
357 围观
去回答
问
wb背景比较杂
Eason老歌迷
你这背景有点埋汰,脏,有小黑点。可能是封闭液的问题,封闭液是不是有小沉淀。是不是你洗膜没洗干净。
3 回答
406 围观
3 回答
406 围观
去回答
问
WB背景有竖纹,该如何解决
Eason老歌迷
想问一下,你是1.0的板还是1.5的板,厚胶容易发生。还有你这是条带笑脸,说明凝胶不均匀冷却,或者是电泳系统温度偏高。
2 回答
1072 围观
2 回答
1072 围观
去回答
问
受体和通路的关系
Eason老歌迷
我举个例子吧,同一神经递质,在神经系统的不同部位会表现出不同的兴奋和抑制效应。只要是突触后膜上受体类型不同。受体不同,通路的效应也不同
1 回答
567 围观
1 回答
567 围观
去回答
问
诱导过程中,菌体碎屑
Eason老歌迷
你有没有在超净台上操作,是不是有杂菌。然后可能是噬菌体感染。
2 回答
834 围观
2 回答
834 围观
去回答
问
WB显影
balalaLy
wb是一门玄学,做得越多越能碰上各种奇奇怪怪的情况。有些情况你也解释不清楚,重复做就是了,实在不行换个抗体,还不行,咱换人做。
3 回答
629 围观
3 回答
629 围观
去回答
问
求问各位WB大神
balalaLy
转膜转够3小时吧,转膜液中甲醇的浓度可以调低点
3 回答
476 围观
3 回答
476 围观
去回答
问
WB条带跑不好
balalaLy
上样体积有点大,loading buffer不能把蛋白压缩,换一种或者往buffer中加一点巯基乙醇。
3 回答
1165 围观
3 回答
1165 围观
去回答
问
LC3B一条带不清晰。
balalaLy
电泳可以再往下跑,差不多把溴芬兰跑出去,转膜时间再延长一下。
3 回答
430 围观
3 回答
430 围观
去回答
问
小胶质细胞
天一湖医者
这个目前个人觉得最有效的分离方法,目标:小胶质细胞(microglia)材料:长到已经融合的小鼠脑胶质细胞混和培养(mixed glial culture)Trypsin-EDTA solution (2.5% trypsin, 1 mM EDTA in HBSS; 25200-072)Dulbecco’s modified Eagle medium-F-12 nutrient mixture (
2 回答
1576 围观
2 回答
1576 围观
去回答
问
假如我顺利取下了小鼠脑袋,我要怎么做用于后续的wb、pcr,免疫组化免疫荧光,
balalaLy
脑袋那么大,要取你需要的部位,wb,pcr的组织量只需要米粒大小就够了,分开保存到-80或液氮,组化和荧光的放固定液中
2 回答
673 围观
2 回答
673 围观
去回答
问
用Elisa检测细胞上清中的IL-6,请问为什么得到的浓度是负数,就算没有也应该是0啊
balalaLy
蛋白量很低的情况下灵敏度是会降低的。有没有做标准曲线,是不是在可检测范围。
3 回答
720 围观
3 回答
720 围观
去回答
问
western blot 内参相关问题?
balalaLy
内参抗体一般很少出问题,使用次数多或者抗体稀释液不好会容易出杂带。用5%bsa in tbst 稀释或者用商品化的抗体稀释液。
3 回答
558 围观
3 回答
558 围观
去回答
问
关于WB实验跑带问题?
天一湖医者
问题出在每一步都有一定的可能性,比如电泳,转膜,敷抗体,显色等等
3 回答
483 围观
3 回答
483 围观
去回答
问
wb只在顶端有结果
balalaLy
有没有可能是抗体失效了,上面那个只是杂带
4 回答
245 围观
4 回答
245 围观
去回答
问
蛋白筛选
Eason老歌迷
wnt信号通路是一个复杂的蛋白质作用网络。wnt配体可与卷曲蛋白相互作用,导致各种细胞内信号传导级联激活,这些信号传导级联又可以交叉连接或独立发挥作用,调节多种多样的生化过程。wnt3a是wnt/β-catenin经典途径中的主要配体。当存在wnt3a配体时,其会与细胞膜上的受体fzd结合激活wnt信号通路,导致β-catenin去磷酸化,使得β-catenin在细胞质中富集并转移至细胞核内,与t
1 回答
597 围观
1 回答
597 围观
去回答
问
蛋白不是花就是拧,每次都是那个地方不好,请问是转膜的问题还是胶或者膜有问题呢
秋秋欣欣
每次都是这样的话估计是你的蛋白有问题了
6 回答
192 围观
6 回答
192 围观
去回答
1
•••
122
123
124
125
126
•••
172
跳至
页
意见反馈
合作咨询
提问
扫一扫
实验小助手
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序