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实验问答23,346,903 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

免疫

蛋白质

问293T细胞的MOI值

12 围观

问请问液氮冻存的细胞如何提蛋白？

维生素CBC

应该可以复苏培养后按照正常提取细胞蛋白的方法，我想问下液氮冻存的动物组织怎么提蛋白？

1 回答46 围观

问实验室滴定的要求及管理以及注意事项

萧莣苼

一、滴定操作要求滴定反应条件反应需具备确定的化学计量关系，定量完成且速率较快（如酸碱滴定、氧化还原滴定等）。需通过指示剂或其他方法（如电位法）明确终点判断，共存物质不得干扰测定。滴定方式包括直接滴定法（如HCl滴定NaOH）、返滴定法（用于慢反应）、置换滴定法和间接滴定法。仪器准备滴定管需洁净干燥，酸式滴定管活塞密封性需检查，碱式滴定管避免挤压玻璃珠下方胶管引入气泡。锥形瓶或烧杯作为反应容器，滴定

1 回答56 围观

问请问大伙，pBad载体，阿拉伯糖诱导型，表达菌株用Rosetta或者bl21可以吗？有什么建议，谢谢

55 围观

问wb 煮蛋白，样品和 sds 按比例加入，sds 刚加进去会产生颗粒，离心混匀， 95 摄氏度加热十分钟，再次离心会分层是为什么？

维生素CBC

loading 太浓或者变质了？上样看看蛋白样品会不会飘出来。

1 回答110 围观

问ellman法测vl21对乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶的抑制率的实验是怎么做的？

32 围观

问ellman法测vl21对乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶的抑制率的实验是怎么做的？

38 围观

问Hela细胞系WB跑不出E-cadherin怎么办

83 围观

问ASC寡聚化有没有好用的牌子的抗体可以推荐一下啊🥺

81 围观

问翌圣生物的10×Tris-Glycine-SDS Running Buffer货号为20319ES76效果如何？

100 围观

问我想请问一下做酵母双杂交实验的实验材料是买整个试剂盒划算一点还是单买其中用到的实验材料划算？

54 围观

问组织冰冻切片染ros需要pfa固定和蔗糖脱水吗？

70 围观

问蛋白的hFc标签和Fc标签一样吗？它们分别是什么啊？？？求助，一直搞不懂

dxy_f2af9zme

Fc 是 IgG 抗体的一段，可以和重组蛋白 A 特异性识别，因此抗体纯化就是利用这个亲和力原理通过蛋白 A 琼脂让凝胶实现的，延伸这个应用我们可以在设计重组蛋白的时候认为加上 Fc 标签，这样就可以通过蛋白 A 琼脂糖实现类“抗体”纯化，目前用的比较多的 Fc 序列来源有人源、兔源、鼠源，即分别为hFc、rFc、mFc，序列是有差异的，特别是做重组免疫原想筛抗体的就需要避开种属，不然免疫的抗体可

1 回答126 围观

问蛋白分离纯化如何提高表达量且单一并具有活性

94 围观

问ASC寡聚化实验求助

120 围观

问原核蛋白表达不出来，IPTG条件优化

dxy_f2af9zme

有针对蛋白抗体的话可以先 WB 压一下；还可以调整诱导温度（比如25°C、30°C）、IPTG 浓度（0.5 有点高）。我们一般做表达小试，会考虑 16°C/25°C/30°C/37°C + 0.1/0.2/0.3/0.5/1 IPTG + 8/12/18 h 诱导时间，多个条件调试出最佳表达条件，实在不表达就需要考虑换载体/系统了。

1 回答126 围观

问LC3 WB 条带不稳定

107 围观

问WB中药低中高剂量设置

89 围观

问为什么我小鼠的DNA条带一直跑不出来呀

62 围观

问之前诱导表达出来过的蛋白近一个月突然表达不出来了，什么原因？

dxy_f2af9zme

可以做个菌液 PCR 看下是不是质粒丢失了。

2 回答163 围观

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