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        植物的rna为啥提取出来纯度每次都很低

        相关实验:RNA- 蛋白复合物中寡核苷酸靶向的RNaseH切割保护实验

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        dxy_8t0ljry9

        哪位大佬能告诉我,我提拟南芥的RNA,用的是Rna-easy-isolation-reagant裂解液,用研钵进行研磨,研磨前也预冷了,戴口罩了,台面也擦了去rna酶的试剂了,也按照说明书进行了,为啥提出来的RNA都是在1.3-1.5之间,1.8就上不去这是为啥?

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        一开始队的研磨本来用的是机器研磨,后来都用手磨了,手磨时候都先预冷,充分用液氮研磨。中间的室温忘了改了是在4度冰上进行,一直到12步骤为止,都是提取rna的步骤。我想请教各位大佬,我这里哪里出问题了嘛都是按照说明书的。
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        4 个回答

        user-title

        illusio

        有帮助

        可能是有蛋白污染了,也有可能是乙醇没有吹干就溶解了,也有可能是样本本身不是很好,有脂肪、糖等的污染。可以纯化一下看看

        user-title

        Topmicro

        有帮助

        看你步骤研磨应该没有问题,纯度和你的研磨没有关系,考虑一下洗涤部分。

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        如果提取rna的纯度很低,可能是你的组织或细胞中 RNA 含量偏低,不同细胞或者组织中RNA的丰度不一样,RNA提取量也不一致。也可能是 样品起始量太少或者太多,样品起始量太少,则细胞组织中RNA含量较低,样品过多则超过裂解液的裂解能力,使得裂解不完全,从而RNA得率低。

        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        有可能是提取过程中75%乙醇清洗次数少了,建议多洗几遍

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