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        细胞长满但是提的RNA浓度低

        相关实验:RNA- 蛋白复合物中寡核苷酸靶向的RNaseH切割保护实验

        user-title

        DNA骨头

        使用的H9C2心肌细胞,以前用AC16细胞提同样密度的细胞RNA有1000多,这就500左右。怎么回事😭还没找到原因,

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        3 个回答

        user-title

        陈皮712

        有帮助

        RNA的质量还行,浓度偏低,但这个浓度也可以继续往下做。不知道你是用Trizol法还是柱法,如果是柱法提取,RNA浓度会比较低,但纯度会更好。Trizol法提取RNA的浓度会比较高,但杂质也相对较多。Trizol法用得更多一些。首先,加入Trizol后,T25瓶的细胞倒掉培养基,不用PBS清洗,直接加0.8-1ml Trizol,铺瓶,放4度冰箱充分裂解10分钟。然后,开一把新的细胞刮刀,充分刮,确保所有细胞都刮下来溶解在Trizol里,只靠Trizol冲一下泡一下并不能很好的使所有细胞脱落。另外,在加入氯仿后,一定确保充分震荡,使混合溶液乳化成乳白色或乳粉色后再离心。

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        看260/280比值都还好,有可能是加氯仿离心取上清存在误差,或者是洗脱的时候没有把RNA完全溶解下来。

        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        有可能是细胞没完全裂解导致的。

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