RNA- 蛋白复合物中寡核苷酸靶向的RNaseH切割保护实验

实验分类：

RNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解实验是分析 RNA 蛋合复合物（RNP，核糖核蛋白颗粒）的方法，无论是对于粗提物还是提纯后的样品，对分析 RNP 的结构域的结构都非常有效。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。

来源：丁香实验

操作方法

RNA-蛋白复合物中寡核苷酸靶向的RNaseH切割保护实验

一、材料与设备所有的缓冲液和溶液必须无 RNA 酶污染。 1. RNP 制备和 DEAE 层析 (1) 缓冲液 D : 20 mmol/L HEPES ( pH 8.0 )，100 mmol/L KCl，0.2 mmol/L EDTA。20% 甘油，高压灭菌。在使用前加 DTT 至 1 mmol/L。加苯甲磺酰氟（PMSF）至 0.1 mmol/L。 (2) DEAE-Sepharose