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        提rna时,检测rna浓度时测量的260/280以及260/230数值对后续逆转录以及扩增有影响吗

        相关实验:RNA提取及检测

        user-title

        由心生无根生

        图片描述

        如题,附上一张我目前测的最好的一次RNA hhh

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        6 个回答

        user-title

        棒打鲜橙girl

        有帮助

        我们实验室一般只看260/280,代表RNA纯度,1.8-2.0最佳,这样跑出来的pcr效果更好,结果较准确

        user-title

        Junego

        有帮助

        RNA产量符合预期的情况下,质量看两点:

        1.OD260/280为1.8-2.1,OD260/280为2-2.5

        2.可以跑核酸胶,看RNA的完整性,好的RNA一般有3条带:依次是28S、18S、5S,28S亮度是18S的两倍。5S可能比较暗,也是正常的。

        以上两点没问题,就可以做逆转录以及PCR扩增了。

        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        一般260/280在1.7-2.0之间即可,低于1.7代表纯度不够,高于2.0可能有醇的影响

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        我的经验是这些比值只能作为一个参考,不用太看重,因为除了核酸纯度会影响比值,核酸浓度也有影响。我做的组织样本量很少,提取的RNA量一般都在100ng以下,同一批处理的样本间比值波动就会比较大,但后续做pcr结果都比较稳定。

        user-title

        未来9

        有帮助

        提取RNA,只要没出现感叹号,就是没问题的。

        出现感叹号的,我也用来跑过荧光定量,没有问题,可以用,但是一般为了严谨,建议舍弃。

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        260/280显示的是蛋白质的污染,260/230是有机溶剂的污染,都会对rna的浓度测量值造成影响,导致逆转录不准。但是看你的值还可以了。

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