大佬们我的PCR基因扩增电泳图为什么条带弥散

（1）PCR需要预变性，（变性，退火，延伸）x35，终延伸，保存。一共六个步骤。分别是98℃-30sec，（98℃-10sec，退火温度℃-15sec，72℃-延伸时间sec）x35，72℃-2min，12℃-∞（有的会用4℃-∞，看你们实验室PCR仪的习惯）。

（2）我用的是Q5酶，延伸时间一般1kb/30sec，你的基因全长3400bp，用的酶有说明书吗？没有的话可以在网上输入酶的名称，查到对应的说明书。一般来说延伸时间设置20sec感觉有点短（？）

（3）还有就是单看条带的话，感觉像是降解了。电压多少啊？太高的话也会导致条带降解。一般100-120v，低一点的电压80v，跑出来的条带可能会好看一些，就是时间会久。

（4）以及模板质量，你用的是之前提的质粒或者胶回收产物作为模板吗？有可能时间长了，模板降解了。可以试着重新提一下质粒作为模板。

（5）如果有条件，还是换用量程比较合适的marker，这样跑出来的图也能用于汇报。

建议你先确定一下延伸时间比较好。