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        求教,如图中,样品的扩增中是二聚体么?

        相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

        user-title

        dxy_ud0dpda4

        求教,如下图,黄色的是阴性对照,蓝色是样品,阴性中是双峰的后一个峰和样品的tm一样,而样品的主峰前也有一个矮峰和阴性的双峰tm接近,那么样品是不是也该判定为存在二聚体的污染?图片描述


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        4 个回答

        user-title

        科研小dog

        有帮助

        可以跑一下琼脂糖凝胶电泳看看,二聚体位置一般在100bp以下,如果有的话,应该就是二聚体,建议重新设计引物。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        考虑是二聚体污染的可能性大,建议去除污染

        user-title

        秋秋欣欣

        有帮助

        二聚体的溶解曲线内峰值一般在75度左右,这个看起来有可能是

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        如果阴性对照中存在一个双峰,其中后一个峰的保留时间(tm)与样品的主峰保留时间相同,而样品的主峰之前也有一个矮峰,且其tm接近阴性对照的双峰,则可能存在二聚体的污染。

        二聚体的污染可能会导致在分析中出现额外的峰或信号。它可能是由于蛋白质或其他样品组分在处理或分析过程中发生聚集而形成的。

        为了确认样品是否存在二聚体的污染,您可以考虑采取以下措施:

        1. 进行其他验证实验:尝试使用其他独立的方法或实验来验证二聚体的存在。例如,可以使用不同的分析技术或方法来检测样品中的二聚体。

        2. 重复实验并进行对照处理:进行重复实验并添加适当的对照处理,以验证在样品中观察到的峰或信号是否确实与二聚体有关。

        3. 使用其他技术进行验证:考虑使用其他技术或方法,如蛋白质交联试验、动态光散射等,来验证样品中是否存在二聚体。

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