内参不齐会对结果有很大的影响吗？差距多少才算齐？怎么保证内参齐呢

内参不齐可能会对结果产生影响，因为内参不齐可能导致组间差异不是由变量本身引起的，而是由内参不齐导致的。因此，在进行实验设计和分析时，应该尽可能地保证内参齐。

内参齐的标准通常是根据变量的测量范围和变异性来确定的。例如，如果内参的变异系数（CV）在5%以下，那么可以认为内参齐。如果CV高于5%，则可能需要考虑进行进一步的标准化或校正。

为了保证内参齐，可以采取以下措施：

仔细选择实验材料或受试者，使其在内参方面具有相似的特征，如年龄、性别、健康状况等。

在实验设计中考虑内参因素，如将受试者随机分组以平衡内参之间的差异。

对内参进行标准化处理，如使用标准曲线、标准品、对照组等。

在数据分析中，对内参进行调整或校正，如使用协变量分析或方差分析中的ANCOVA方法。

对结果不会有太大影响，只要都能跑出来就行，逆转录的RNA量以及稀释倍数保持差不多就行

内参不齐会影响目的基因的结果判断，建议可将CT值差异较大的cDNA做不同梯度的倍比稀释进行qPCR，选择CT值差异小于2个循环的cDNA稀释倍数进行实验。

内参不齐会对结果有影响，影响大小与差异大小有关。不同样本的内参差距建议在10倍以内，约3.3个Ct值。起始RNA含量一致，完整性相似就可以保证内参基本一致。