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        关于qPCR目的无数据

        相关实验:反向 PCR (inverse-PCR)

        user-title

        Wbalaba

        跑的内参应该还不错,每次都是15-17,目的跑不出来,想问问怎么回事,心态真的要崩。换过引物(但是同样序列)。图片描述

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        3 个回答

        user-title

        Topmicro

        有帮助

        建议重新查阅几篇文献,看看同一目的基因的引物序列是否有差异,如果有的话更换其他序列进行检测。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可能是目的基因表达过低,达不到qpcr检测量。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        有以下几种可能性:

        目的基因表达量太低:可能是因为该基因在您的样本中表达量太低,不足以被检测到。您可以尝试提高模板的浓度或者扩增周期数,或者使用更灵敏的检测方法。

        引物设计问题:您说已经更换了相同序列的引物,但仍然无法扩增出目的基因。可能需要重新设计引物,确保引物的特异性和灵敏度。

        检测条件问题:检测条件的设置可能需要调整,例如温度,时间等等,这可能会影响PCR扩增的效率。您可以尝试调整PCR扩增的条件,例如提高退火温度等。

        样品污染:可能存在样品污染,例如RNA质量不佳或者被污染等等,这可能会影响PCR扩增的效率。您可以尝试更换RNA提取试剂盒、提高RNA纯度等。

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