PCR扩增，扩增后进行1%电泳，没有条带

dxy_kg0gr2v5

2022-06-21

目的片段长度：1500bp

tap酶：赛默飞绿酶

程序：95℃ 3min

95℃ 30s

57-62℃ 30s

72℃ 1-2min

35个循环

72℃ 10min

模板为cDNA，验证没有问题，引物也已更换多次

秋秋欣欣

2022-06-24

有帮助

那会不会是酶有问题呢，以及变温温度是否合适。

迟C迟

2022-06-22

有帮助

模板没有问题，那问题可能出在酶、引物、机器、电泳等等，逐步检查实验细节。确认酶有活性、电泳是否插电、胶里面是否加染料等等。

bamboopiggy

2022-06-21

有帮助

根据你的引物tm来决定annealing temperature，你试试1500bp分成两段pcr会不会好一些。

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