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        PCR扩增，扩增后进行1%电泳，没有条带

        相关实验：逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR，rtpcr）

        user-title

        dxy_kg0gr2v5

        目的片段长度：1500bp

        tap酶：赛默飞绿酶

        程序：95℃ 3min

        95℃ 30s

        57-62℃ 30s

        72℃ 1-2min

        35个循环

        72℃ 10min

        模板为cDNA，验证没有问题，引物也已更换多次

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        3 个回答

        user-title

        秋秋欣欣

        有帮助

        那会不会是酶有问题呢，以及变温温度是否合适。

        user-title

        迟C迟

        有帮助

        模板没有问题，那问题可能出在酶、引物、机器、电泳等等，逐步检查实验细节。确认酶有活性、电泳是否插电、胶里面是否加染料等等。

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        根据你的引物tm来决定annealing temperature，你试试1500bp分成两段pcr会不会好一些。

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