q-pcr验证高通量测序结果，结果为啥反复横跳？
柒小落丁香园
q-pcr比较空白和模型组的某个基因表达，结果和测序结果总是反复，重现性差，今天做出来了，明天又做不出来，条件什么的都尽量保持一致了，这样的结果可靠吗？
6 个回答
汤姆卜丽波
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这样的结果是不行的，三次独立重复的话。每次都要提RNA之后测浓度，必要时还要跑胶防止降解
dxywode
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请问cDNA是如何保存的,有可能是cDNA时间过长降解了。
秋秋欣欣
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结果反复肯定是不可靠的，建议用不同的样本，做三次独立重复看看。
Eason老歌迷
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有几种原因。可能是你没有用同一批样品来检验；或者你的样品有污染、核糖体污染——转录组的基因表达量计算有误；做QPCR验证的基因表达量偏低，差异不显著；两种方法本身存在差异，出现不一致情况也正常（40%左右）。
天一湖医者
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有可能是cDNA时间过长降解了。
bamboopiggy
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为什么要qcpr验证呢？就是因为测序结果也可能不准，如果你在所有条件都最优化的情况下，还做不准，可能就是这个基因的表达有问题
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