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        提取出的RNA在逆转录之前跑胶验证,这一步是杂志必须要求的么,具体怎么跑呢,和DNA一样么

        相关实验:逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR,rtpcr)

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        灵枢天问

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        4 个回答

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        实验严谨的,是要跑胶看一下rna的完整性。方法和跑DNA差不多,只是配胶的液体中要加入DEPC,防止RNA降解。

        user-title

        汤姆卜丽波

        有帮助

        有着杂志会要求跑一下,看RNA有无降解,

        保险的话还是跑一次,如果杂志要求了。

        步骤如下:

        将制胶用具用70%乙醇冲冼一遍,晾干备用。

        配制琼脂糖凝胶。

        ①称取0.5g琼脂糖,置干净的100ml 锥形瓶中,加入40ml蒸馏水,微波炉内加热使琼脂糖彻底溶化均匀。

        ②待胶凉至60--70 ℃,依次向其中加入9ml甲醛、5ml 10X MOPS缓冲液和0.5μ|溴化乙锭,混合均匀。

        ③灌制琼脂糖凝胶。

        样品准备:

        ① 取DEPC处理过的500μ|小离心管,依次加入如下试剂: 10x MOPS缓冲液2ul,甲醛3.5μ|,甲酰胺(去离子)10μ|,RNA 样品4.5μ|,混匀。

        ② 将离心管置于60℃水浴中保10分钟,再置冰上2分钟。

        ③ 向管中加入3μ| 上样染料,混匀。

        上样。

        电泳:电泳槽内加入1XMOPS缓冲液,于7.5V/ml 的电压下电泳。

        电泳结束后,在紫外灯下检查结果。

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        是的,一般提取出的RNA在逆转录之前需要跑胶验证。

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        Eason老歌迷

        有帮助

        不是说杂志必须要求,是你要验证你提没提出来。具体可以查看文献,和dna差不多

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