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        跑qPCR,内参基因和目的基因CT值正常,结果也比较理想,但内参基因熔解曲线呈较宽的单峰,Tm比目的基因熔解曲线低很多,有效吗?

        相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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        悠悠悠悠然

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        3 个回答

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        看图,感觉两个melt curve 底边是一样宽的,但是你如果觉得内参基因的宽,可以考虑换一个大家常用的内参基因试试,一般情况,内参基因不会出现这种问题。

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        天一湖医者

        有帮助

        这可能存在大小相近的非特异性产物,可以利用高分辨率琼脂糖电泳确认。

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        Eason老歌迷

        有帮助

        做pcr通常通过熔解曲线来判断结果的特异性,理想的熔解曲线应该是单峰,异常的熔解曲线会出现杂峰、双峰、宽峰等可能的情况。你这种情况可可能存在大小相近的非特异性产物,可以利用高分辨率琼脂糖电泳确认。

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